期刊简介
本刊1985年由卫生部创刊。是卫生部主管：中华预防医学会主办的国家级学术刊物，是我国公共卫生与预防医学领域综合性业务期刊，是中国自然科学核心期刊，中国中文核心期刊。理论研究与实际应用相结合学术报道与经验交流并重，着重反映我国预防医学领域新动态，新成果、新技术、以及公共卫生、疾病控制的经验与技术。读者对象主要是本领域各级业务研究人员和技术人员。
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首页>中国公共卫生杂志
- 杂志名称：中国公共卫生杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1001-0580
- 国内刊号：21-1234/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会系列期刊优秀期刊二等奖(99）期刊收录：国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
H7N9禽流感病毒重组质粒构建及应用
张锦海；陈文琦；胡丹；王平；吕恒；刘玉；陈凤娟；任浩；王长军
关键词：H7N9禽流感病毒, 血凝素, 神经氨酸酶, 基质蛋白, 标准品
摘要：目的 构建一种含H7N9禽流感病毒全长血凝素/神经氨酸酶/基质蛋白(HA/NA/M)基因的重组质粒,为核酸检测方法提供一种通用的阳性定量标准品.方法 设计H7N9禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H7N9禽流感病毒总RNA后用实时荧光定量PCR获得相应片段,用3次酶切连接方法,依次插入到pGEM-T easy质粒,进行测序确认;线性化后的重组质粒用T7 RNA聚合酶进行体外转录,RNA转录产物纯化后测定浓度,用实时荧光定量PCR构建标准曲线进行验证.结果 HA、NA和M基因扩增片段大小分别约为1.7、1.3、1.1 kb,与预期相符;构建的重组质粒pGEM-HA-NA-M插入片段的测序结果与GenBank公布序列一致;由重组质粒体外转录获得同时含有H7N9禽流感病毒HA、NA、M全长开放阅读框序列的RNA片段质量浓度为399.5 ng/μL,梯度稀释后用3种实时荧光定量PCR方法均获得了良好的标准曲线.结论 成功构建重组质粒pGEM-HA-NA-M,由此质粒体外转录获得的RNA片段可作为H7N9禽流感病毒核酸快速检测方法通用的阳性定量标准品.
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