期刊简介
本刊1985年由卫生部创刊。是卫生部主管：中华预防医学会主办的国家级学术刊物，是我国公共卫生与预防医学领域综合性业务期刊，是中国自然科学核心期刊，中国中文核心期刊。理论研究与实际应用相结合学术报道与经验交流并重，着重反映我国预防医学领域新动态，新成果、新技术、以及公共卫生、疾病控制的经验与技术。读者对象主要是本领域各级业务研究人员和技术人员。
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首页>中国公共卫生杂志
- 杂志名称：中国公共卫生杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1001-0580
- 国内刊号：21-1234/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会系列期刊优秀期刊二等奖(99）期刊收录：国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
小鼠截短型CDC25B蛋白PKA体外磷酸化分析
肖建英；范会瑜；刘超；张哲；宗志红；于秉治
关键词：小鼠, CDC25B, PKA, 体外磷酸化
摘要：目的 通过体外磷酸化研究和放射自显影技术证实小鼠CDC25B蛋白是蛋白激酶A(PKA)的直接作用底物.方法 构建小鼠截短型pGEx-4T-2-CDC25B201原核表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化CDC25B蛋白,与PKA进行体外磷酸化反应,分别采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(western blot)和放射自显影鉴定CDC25B是否为PKA直接磷酸化底物.结果 在E.coli BL21细胞内,采用0.1 mmol/L的IPTG在27℃条件下诱导表达3h即可达到较高表达水平；SDS-PAGE显示在约50kD处有明显GST-CDC25B201融合蛋白特异条带；放射自显影显示GST-CDC25B201融合蛋白的磷酸化条带大约位于55 kD处；Western blot分析,在重组质粒表达的总蛋白、载体表达的GST蛋白、纯化蛋白及磷酸化蛋白的相应位置均出现GST抗体的杂交条带.结论 小鼠CDC25B蛋白是PKA的直接作用底物.
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