期刊简介
本刊1985年由卫生部创刊。是卫生部主管：中华预防医学会主办的国家级学术刊物，是我国公共卫生与预防医学领域综合性业务期刊，是中国自然科学核心期刊，中国中文核心期刊。理论研究与实际应用相结合学术报道与经验交流并重，着重反映我国预防医学领域新动态，新成果、新技术、以及公共卫生、疾病控制的经验与技术。读者对象主要是本领域各级业务研究人员和技术人员。
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首页>中国公共卫生杂志
- 杂志名称：中国公共卫生杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1001-0580
- 国内刊号：21-1234/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会系列期刊优秀期刊二等奖(99）期刊收录：国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
基因重组胰高血糖素样肽-1(GLP-1)衍生物优化
马义；周天鸿；黄秀梅；闫彬；李月琴；邹奕；张欣；李弘剑
关键词：基因重组, 胰高血糖素样肽-1衍生物, 高效液相色谱, 质谱
摘要：目的 研究利用基因重组方法生产人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)衍生物的佳表达及纯化条件.方法 选用大肠埃希菌偏爱密码子,以含人GLP-1的质粒为模板,用重叠PCR方法合成全长人GLP-1衍生物基因,并定向插入到高效表达载体pMFH中,用大肠埃希菌BL21进行表达,融合蛋白经Ni-NTA柱纯化后,用C18 Sep-Pak反相柱脱盐,然后融合蛋白经甲酸水解,水解产物经Ni-NTA柱和高效液相色谱(HPLC)纯化、制备后,目的肽由质谱鉴定.结果 利用载体pMFH在BL21中,GLP-1衍生物的佳诱导表达温度为37℃、诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的佳浓度为0.6 mmol/L,佳诱导表达时间为6 h;HPLC分析和制备GLP-1衍生物佳洗脱条件为:30 min线性梯度洗脱,流动相A(100%乙腈)由10%至70%,流动相B(100%水,0.1%三氟乙酸)由90%至30%;流速1 ml/min;检测波长280 nm;质谱鉴定GLP-1衍生物的分子量为5548Da,与理论值相符合.结论 在佳表达及纯化条件下可得到高产量和高纯度(＞98%)的GLP-1衍生物.
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