期刊简介
本刊1985年由卫生部创刊。是卫生部主管：中华预防医学会主办的国家级学术刊物，是我国公共卫生与预防医学领域综合性业务期刊，是中国自然科学核心期刊，中国中文核心期刊。理论研究与实际应用相结合学术报道与经验交流并重，着重反映我国预防医学领域新动态，新成果、新技术、以及公共卫生、疾病控制的经验与技术。读者对象主要是本领域各级业务研究人员和技术人员。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>中国公共卫生杂志
- 杂志名称：中国公共卫生杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1001-0580
- 国内刊号：21-1234/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会系列期刊优秀期刊二等奖(99）期刊收录：国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
人乳头瘤病毒重组质粒的构建及蛋白表达
李迪；谷鸿喜；庄敏；张凤民
关键词：人乳头瘤病毒18型L1基因, 基因重组, 蛋白表达
摘要：目的构建重组原核表达质粒获得人乳头瘤病毒18型L1片段(HPV18L1)活性蛋白,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础.方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩增HPV18L1DNA片段,将HPV18L1DNA与质粒(pUC19)重组构建重组质粒(pUC19-HPV18L1).用酶切电泳验证重组结果的正确性;并通过测序检查质粒重组后序列有无变化.再利用质粒(pQE32)做表达载体构建重组质粒(pQE32-HPV18L1),并用酶切电泳验证.将重组质粒pQE32-HPV18L1转入工程菌(M15),用酶切电泳验证重组工程菌(pQE32-HPV18L1/M15)正确性.利用SDS-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测HPV18L1目的蛋白.采用不同浓度异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)、不同诱导时间来优化HPV18L1目的蛋白表达条件.利用Western印迹检测蛋白质(Western blot)鉴定HPV18L1目的蛋白的特异性.结果PCR扩增DNA片段约为1.7 Kb,与预期结果相同.克隆重组质粒pUC19-HPV18L1酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变.表达重组质粒pQE32-HPV18L1酶切图谱亦与预期相同.蛋白表达条件优化结果为1 mmol/LIPTG诱导4 h后,获得HPV18L1佳蛋白表达量:SDS-PAGE显示,约63KD处可见目的蛋白带,与预期结果一致.Western blot鉴定,在约63 KD处可见目的条带,与预期结果一致.结论成功构建表达重组质粒pQE32-HPV18L1并能表达HPV18L1目的蛋白.
友情链接